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      1. 武漢尚恩生物技術有限公司

        細胞系_培養基_血清_輔助試劑_胰酶

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          制造商

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          2014

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          細胞系_培養基_血清_輔助試劑_胰酶

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        HFL1細胞系人胚肺成纖維細胞
        點擊圖片查看原圖
        產品: 瀏覽次數:137HFL1細胞系人胚肺成纖維細胞 
        品牌: 尚恩生物
        細胞貨號: SNL-017
        生長情況: 貼壁
        包裝: T25瓶
        單價: 100.00元/株
        最小起訂量: 1 株
        供貨總量: 60 株
        發貨期限: 自買家付款之日起 3 天內發貨
        有效期至: 長期有效
        最后更新: 2021-09-22 10:22
        詳細信息


        一、細胞基本屬性

        細胞名稱 人胚肺成纖維細胞
        細胞別稱 HFL1; HFL-1; HFL 1; Human fetal lung fibroblast 1; HFL
        細胞貨號 SNL-017
        細胞種屬 人
        生長情況 貼壁
        培養條件 H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
        培養環境 air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
        二、細胞培養操作
        換液周期 2-3天
        培養基體積 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
        傳代比例 1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
        傳代方法 1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
        2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
        3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
        4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
        5.消化到細胞間隙變大,但未完全脫落時加2-3ml完全培養基終止胰酶消化;
        6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
        7.加新的完全培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
        8.補足完全培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
        注意事項 不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
        消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
        三、細胞凍存操作
        凍存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%完全培養基+8%DMSO(高手建議);
        凍存規格 200-300萬/ml,1ml每管
        凍存方法 1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
        2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
        3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存
        注意事項 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
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